什么情况下需要进行艾滋病自测?一般来说,有过高危行为,就应该进行艾滋病自测,比如:不安全的性行为,共用了针管,使用了消毒不严格的器械等。艾滋病自测只需15分钟左右就可以得到检测结果,操作很简单,将手指血滴加到艾滋试纸上面即可。检测结果通过红线来判读,一条红线代表阴性,说明没有感染,二条红线代表阳性,说明可能感染了,具体以艾滋试纸的说明书为准。艾滋病试纸的准确率大于99%,虽说有极小的机率出现假阴或假阳,但通过多次检测,结果相同的话,则100%准确。艾滋试纸主流品牌有雅培,艾博,爱卫,韩国SD四代等,可在[aizibing88.com]领取。

艾滋病试纸

现阶段,艾滋病主要在高危人群中传播,如果有过高危行为,如不洁的性行为,共用针管吸毒等,就需要进行艾滋病自测,相比之下,普通人群感染艾滋的机率较低,但也可以进行艾滋病自测。艾滋病自测只需15分钟左右就可以得到检测结果,操作很简单,将手指血滴加到艾滋试纸上面即可。

4代SD艾滋病试纸

韩国SD试纸(4代)由于窗口期的存在,3代试纸在检测抗体时,往往需要等待2-6周,韩国SD试纸(4代)可同时检测p24抗原及HIV抗体,可将窗口期缩短至2周左右,不用在恐艾中等待。4代SD艾滋病试纸目前广泛用于各三甲大医院,单次检测结果的准确率在99%以上,若两次以上结果相同,则100%准确。可同时检测p24抗原及HIV抗体,可以使窗口期提前二周多,是一种非常好的艾滋病检测试纸。

艾滋病检测方法学

(一)制备模板

一般以外周血单核细胞(PBMC)中的前病毒DNA作为扩增的模板。制备模板的步骤包括抗凝采集全血、分离PBMC、裂解细胞,上清液即可作为模板。为了提高检测的效率,可用酚—氯仿抽提或硅化物吸附的方法脱蛋白,将DNA纯化。这种手工制备模板的方法需要全血5-7ml,耗时8h左右。现在已有自动化的DNA提取装置,只需要很少量的标本(0.5-2.0ml全血)、较短的时间(4 h),而且标本不会污染。

(二)设计与合成引物

选择合适的引物是PCR成功的关键。由于艾滋病毒株的变异较大,应选择艾滋病基因相对保守且没有二级结构的序列作为扩增的靶序列,扩增片段以100-300bp为宜。已经确定的HIV基因保守区是gag、tat、env,pol、LTR基因中的)某些核苷酸序列。最初使用的引物多数是以HIV-1B亚型基因为基础设计的,这有可能错过HIV-1B亚型以外的其他亚型,特别是0亚型和HIV-2。因此最好设计适用于所有HⅣ亚型特别是0亚型扩增的引物,扩大PCR方法覆盖的毒株,提高艾滋病检测的敏感性。

(三)扩增

扩增反应的退火温度和循环数在不同的实验室变化较大,退火温度的高低决定PCR产物的特异性,在一定范围内增加循环数可以提高产物的产量。一般使用聊基因gag区的引物,例如一个典型扩增的条件可以是90 – 95℃,10 s、55 – 60℃,10 s、72cC:,10 s;30个循环,然后72cC延伸5 min。通过这个步骤可将HIVDNA扩增100万倍。

(四)扩增产物的检测和分析

1、琼脂糖凝胶电泳  与阳性和阴性对照以及DNA分子量标准比较观察有无预期分子量的特异性扩增产物。将产物用限制性切酶水解可以近一步确定扩增产物的特异性。

2、分子杂交分析  是检测PCR产物特异性的一种较好的方法,也是艾滋病检测扩增产物的非限制性内切酶位点上碱基突变的有效方法。这个方法的基础是标记探针与两条引物链之间特异DNA片段的互补性。阳性结果说明PCR产物是特异性的。可利用多产物的碱甚率峦-格针可以用同估壶止45,丧旃业套JL学磐业产物的碱基突变。探针可以用同位素、生物素、荧光素、化学发光物质等进行标记,用相应的方法进行艾滋病检测。

3、核苷酸序列分析  是检测PCR产物特异性的最可靠的方法,但常规艾滋病检测时较少使用。